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产品名称:

猪圆环病毒荧光PCR试剂盒

产品型号: 产品时间: 2019-04-10
猪圆环病毒荧光PCR试剂盒,采用聚合酶链反应(PCR )技术检测猪血清和组织中的PCV,适用于PCV的检测•●、诊断和流行病学调查。
提取DNA作为模板,在DNA 聚合酶的作用下,经高温变性•●、低温退火和中温延伸的多次循环,使特异DNA 片段的拷贝数放大数百万倍。将扩增的DNA 片段进行电泳•●、染色后,在紫外灯下,肉眼可见DNA 片段的扩增带。

产品概述

  
  猪圆环病毒荧光PCR试剂盒使用说明书

  【试剂盒简介】
  猪圆环病毒荧光PCR试剂盒,采用聚合酶链反应(PCR)技术检测猪血清和组织中的PCV,适用于PCV的检测•●、诊断和流行病学调查。
  
  【原理】
  提取DNA作为模板,在DNA聚合酶的作用下,经高温变性•●、低温退火和中温延伸的多次循环,使特异DNA片段的拷贝数放大数百万倍。将扩增的DNA片段进行电泳•●、染色后,在紫外灯下,肉眼可见DNA片段的扩增带。
 

【试剂盒组份】

1. 生理盐水 20mL 8. 吸附柱和收集管 10套
2. 裂解液 6mL 9. 0.2 mL 薄壁PCR 管 15个
3. 洗涤液A 7mL 10. RT-PCR 反应液A 180μL
4. 洗涤液B 7mL 11. RT-PCR 反应液B 50μL
5. 洗脱液 500μL 12. 50 倍TAE 电泳缓冲液 20mL
6. 阴性对照 300μL 13. 染色液 10μL
7. 阳性对照 300μL    

注:塑料袋内试剂(阳性对照•●、RT-PCR反应液A和B)-20 ℃冻存,裂解液2-8℃冷藏,其他室温保存。

登革热检测试剂盒
甲型乙型流感病毒抗原检测试剂盒(生研)
瑞必欧甲型/乙型流感快速检测试剂盒
甲乙型流感抗原检测试剂盒
登革热&寨卡病毒联检试剂盒


  
  【操作方法】
  一•●、样品制备
  1样品采集:病死或扑杀的猪,取肺•●、扁桃体和脑等组织;待检活猪,用注射器取血5mL,2~8℃保存。(要求送检病料新鲜,严禁反复冻融。)
  2样品处理:
  2.1组织样品的处理:称取组织0.1g于研磨器中磨碎,再加1mL生理盐水继续磨至无块状物;然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取100µL上清于1.5mL灭菌离心管中。
  2.2全血样品的处理:待血凝后取100µL血清于1.5mL灭菌离心管中。
  2.3阳性对照的处理:取阳性对照100µL于1.5mL灭菌离心管中。
  2.4阴性对照的处理:取阴性对照100µL于1.5mL灭菌离心管中。
  二•●、病毒RNA的提取
  1.取已处理的样品•●、阴性对照和阳性对照,分别加入450µL裂解液,充分颠倒混匀,室温静置3min。
  2.加入275µL无水乙醇,轻轻混匀。
  3.将混合液吸入吸附柱中(吸取液体时尽量不要吸到悬浮杂质,以免离心时堵塞吸附柱),10,000rpm离心1min,弃去收集管中液体,套回收集管。
  4.向吸附柱中加入500µL洗涤液A,10,000rpm离心1min,弃去收集管中液体,套回收集管。
  5.向吸附柱中加入500µL洗涤液B,10,000rpm离心1min,弃去收集管中液体,套回收集管。
  6.空柱10,000rpm离心2min。
  7.将吸附柱移入新的无RNA酶的1.5mL离心管中,在膜中央加入30µL洗脱液,室温静置2min,10,000rpm离心1min,获得总RNA。
  三•●、RT-PCR
  1.反应体系:分别取14µLRT-PCR反应液A(用前混匀)•●、4µLRT-PCR反应液B(用前混匀)和2µL模板RNA,混匀。
  2.反应程序:在PCR仪上运行以下程序:42℃45min,94℃3min;94℃30s•●、53℃30s•●、72℃30s,35个循环;72℃延伸10min。
  四•●、电泳
  1.制胶:用50倍稀释的TAE电泳缓冲液配制1%琼脂糖凝胶。
  2.电泳:待胶凝固后,取5µLPCR扩增产物点样于琼脂糖凝胶孔中,以5V/cm的电压于50倍稀释的TAE电泳缓冲液中电泳。
  3.染色:取50倍稀释的TAE电泳缓冲液30mL,加入10µL染色液,混匀后将胶浸泡30min,于紫外灯下观察结果。
  
  
  【结果判断】
  阳性对照出现494bp扩增带,阴性对照无带出现(引物带除外)时,实验结果成立。被检样品出现494bp扩增带为猪蓝耳病毒阳性,否则为阴性。
  
  
  【需用但未提供的材料】
  组织研磨器•●、眼科剪•●、眼科镊•●、一次性注射器•●、琼脂糖•●、经焦碳酸二乙酯(DEPC)处理的灭菌1.5mL离心管和吸头(10µL•●、200µL•●、1000µL)。
  
  
  【猪圆环病毒荧光PCR试剂盒注意事项】
  1.本试剂盒有效期为6个月,不要使用超过有效期限的试剂,试剂盒之间的组分不要混用。
  2.所有试剂应在规定的温度储存,使用时拿到室温下,使用后立即放回。
  3.注意防止试剂盒组分受污染。使用前将塑料袋内试剂瞬离15s,使液体全部沉于管底,放于冰盒中,吸取液体时移液器吸头尽量在液体表面层吸取。
  4.严格按试剂盒说明书操作可以获得Z好的结果。操作过程中移液•●、定时等全部过程必须精确。
  5.RNA提取过程中,应戴口罩•●、勤换手套,尽量缩短操作时间。
  6.所有接触病料的物品均应合理处理,以免污染实验室。
  
  
  公司优势:
  1)质量:我司提供的的试剂均经过出厂检测。不对可退换
  2)价格:价格实惠,量大从优,产品价格随时会变动,实时报价还请来电获取。
  4)服务:提供完整的售前•●、售后和售中服务。售后到底


除了猪圆环病毒荧光PCR试剂盒我公司还提供:

汉坦病毒IgG/IgM检测试剂盒
肺炎链球菌抗原检测试剂盒(BinaxNow)
登革热NS1抗原快速检测试剂盒(胶体金法)
疟原虫抗原检测试剂盒(BinaxNow)
疟原虫抗原检测试剂盒

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